色譜柱是液相色譜系統(tǒng)的“心臟”,其性能直接決定了分離效果與檢測靈敏度。一支優(yōu)質(zhì)的色譜柱價格不菲,且壽命受使用條件影響顯著。通過科學的保養(yǎng)維護,不僅能保持其分離效率,更能延長使用壽命,降低分析成本。
使用前的預處理是關(guān)鍵。新色譜柱啟用前,需用與分析流動相兼容的溶劑(通常是純甲醇或乙腈)沖洗20-30倍柱體積,去除出廠保存液中的殘留物;若流動相含緩沖鹽,需先用10%有機相(如甲醇)過渡,再逐步替換為目標流動相,避免鹽析堵塞。對于長期未使用的色譜柱,同樣需用初始流動相充分沖洗,恢復填料活性。
日常使用的規(guī)范操作是核心。首先,流動相必須經(jīng)過0.45μm(或更細)濾膜過濾并超聲脫氣,防止顆粒雜質(zhì)劃傷填料表面;其次,嚴格控制進樣量——常規(guī)分析進樣體積不超過20μL,復雜樣品建議先通過保護柱過濾;再者,避免壓力沖擊,如突然調(diào)節(jié)流速或切換高粘度流動相,否則可能導致填料塌陷。若分析物易殘留(如蛋白質(zhì)、脂類),需定期用強洗脫溶劑(如0.1%甲酸-乙腈混合液)沖洗柱內(nèi)殘留物。

定期深度維護是保障。每進樣50-100次或壓力明顯升高(超過初始值20%)時,需對色譜柱進行清洗:反向沖洗(若柱子允許)可更高效清除柱頭污染物;對于強保留物質(zhì)污染,可用高比例有機相(如95%乙腈)或酸堿溶液(如0.1 mol/L硝酸/氫氧化鈉,需根據(jù)填料耐受性選擇)浸泡處理,但時間不宜超過30分鐘。長期不用時,需用純甲醇或乙腈沖洗至基線平穩(wěn),密封保存于陰涼處,避免填料干燥變形。
色譜柱的保養(yǎng)并非“額外負擔”,而是對其性能的持續(xù)呵護。通過規(guī)范使用與定期維護,不僅能維持穩(wěn)定的分離效果,更能將單支色譜柱的使用周期延長數(shù)倍,讓每一分投入都轉(zhuǎn)化為可靠的檢測數(shù)據(jù)。